生物选修一知识点

2022-10-11 12:20  阅读 60 次

生物选修一六个实验:
1.果醋和果酒的制作
2.腐乳的制作
3.探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
4.酵母细胞的固定化
5.DNA的粗提取和鉴定
6.血红蛋白的提取和分离

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选修1   生物技术实践
第一部分  微生物的利用(是重点)
一、课标内容:进行微生物的分离和培养
二、教学要求:
实验1   大肠杆菌的培养和分离
基本要求 1, 进行大肠杆菌的扩增,利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2, 进行大肠杆菌的分离,用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
发展要求 说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
说明 实验2和实验3不作要求。
三、考纲要求:
知识内容 要求
(1)微生物的分离和培养
(2)培养基对微生物的选择作用
(3)利用微生物进行发酵来生产特定的产物 掌握程度参考本考试说明中的:
1.考核目标与要求
2.实验与探究能力。
四、知识要点:
1,微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物,包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物,有细胞壁(肽聚糖)、细胞膜、细胞质,无成型的细胞核,只有一环状DNA分子(拟核)。以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。
*2,细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少,。划线最后,可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养基培养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释到10-5~10-7之间,然后去0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿中有20个以内的单菌落为最合适。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后,再做功能性实验。
划线分离法,方法简单;涂布分离法,单菌落更易分开,但操作复杂。
3, 在培养微生物时,必须进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。进行恒温培养时,要将培养皿倒置,是因为培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发,倒放培养皿会使水蒸气凝结成水滴后,落入培养基的表面并且扩散,菌落中的细菌也会随水扩散,菌落见相互影响,很难在分成单菌落,达不到分离的目的。
4, 细菌扩大培养要用LB液体培养基(通用培养基、常用于做生理学研究和发酵工业),划线分离要用LB固体培养基(常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存)。“细菌喜荤,霉菌喜素”,通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制,还要加入一定的氯化钠,以维持一定的渗透压;霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。尽管培养基的配方各不相同,但其基本成分都一样(五类)。(复习时注意联系微生物的有关内容)
第三部分    生物技术在食品加工中的应用
第四部分    浅尝现代生物技术
一、 课标内容:
1,运用发酵食品加工的基本方法。
2,测定食品加工中可能产生的有害物质。
3,尝试植物组织培养
二、考纲要求:
知识内容 要求
(1)从生物材料中提取某些特定的成分
(2)运用发酵食品加工的基本方法
(3)植物的组织培养 掌握程度参考本考试说明中的:
1.考核目标与要求
2.实验与探究能力。
三、教学要求:
实验8   果酒及果醋的制作
基本要求 1, 制作葡萄酒和果酒。
2, 制作果醋。
发展要求 设计并安装简单的生产果酒及生产果醋的装置。
说明 
知识要点(注意与微生物、呼吸作用的联系):
1,酿酒和制醋有关的微生物分别是酵母菌(真菌)和醋杆菌(细菌)。制作酒和醋的过程:在糯米或大米与酒曲混匀后,放在温度较高的地方,米先变甜,即生成了糖,这是由于黑曲霉或黑根霉的淀粉酶将淀粉水解成糖。甜度增加后,再放到温度低的地方保持厌氧条件,酵母就开始工作,使糖变成酒(糖酵解)。反应式    。如果时间太长,在有氧条件下,醋酸菌就开始作用,将乙醇氧化成乙酸,也就是变酸生成醋。反应式    。
2,用葡萄制作葡萄酒时,一般不加蔗糖,都只用野生酵母,但是本实验为了加速反应,使观察更直观,需要有更多底物参加反应,所以加入酵母使酒精发酵占有优势。使用高锰酸钾溶液浸泡葡萄的目的是为了防止杂菌污染,也是消灭了野生酵母。发酵瓶中的液体不能装满是因为发酵过程中气体产生,如果装满会使液体外溢,导致发酵液损失和瓶口等处污染杂菌,影响产物品质。用装着水的弯曲玻璃管可以防止氧气进入,发酵产生的二氧化碳可以出去,还可以防止空气中杂菌的污染。
3, 制醋有固态发酵和液态发酵,本实验属于固定化菌体连续发酵工艺。制醋时要向发酵瓶中通入空气,保证发酵是一个氧化过程,要用棉花过滤是防止空气中的微生物进入。
实验10 泡菜的腌制和亚硝酸的测定
基本要求 1, 进行泡菜的腌制。
2, 测定泡菜中亚硝酸的含量。
发展要求 讨论相关的食品安全问题。
说明 实验7不作要求。实验9 有条件的学校可以做。
知识要点:
1, 泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌。这类食品含有乳酸和丰富的维生素、矿物质等营养成分,但蛋白质含量低,还含有一定量的亚硝酸盐。所用原料是白菜、洋白菜等。在无氧的条件(由所用容器的凹槽加水在加盖造成)下,微生物利用菜中的糖和其他营养物进行发酵,乳酸菌将糖分转化为乳酸,这是需氧菌被杀死;当有机酸增加到一定程度时,乳酸菌被杀死,出现酵母和霉菌,并逐渐产生亚硝酸。加白酒的作用是可抑制杂菌的生长,也是一种调味剂,增加醇香感。加盐不要太多,否则会使乳酸菌发酵迟缓。温度高则发酵快,但口味差些。
2, 杂菌较少的原因是乳酸菌产生的乳酸球菌肽对许多革兰氏阳性菌有抗菌作用,蛋白质含量低,白酒的抑制作用等。
3,亚硝酸盐是对人体有害,引起中毒,可致癌的物质,由假丝酵母产生。可与对氨基本磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N—1—萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量。实验步骤包括样品处理、测定、标准曲线(以亚硝酸钠质量为横坐标以光密度OD值为纵坐标)、计算[亚硝酸盐含量(mg/kg)X1=通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量(ug)m2×1000×样品处理液总体积V1/样品质量m1×测定样品液总体积V2×1000)]。
实验11   植物组织培养
基本要求 1, 进行菊花的组织培养。
2, 尝试植物激素的应用。
发展要求 
说明 
知识要点(注意与选修2、3中的植物组织培养的联系):
1,植物无性生殖的方法有扦插、嫁接和组织培养等。植物组织培养有两种形式:愈伤组织培养(固体培养基、琼脂培养基)和细胞悬浮培养(液体培养基)。植物组织培养的原理是细胞的全能性。植物组织培养的应用在快速繁殖、除去植物病毒、新品种的培育(诱变育种、花药或花粉的单倍体培育、细胞融合、基因工程等)、品种资源的保护、某些代谢产物(如色素、芳香物质等)的生产等方面。植物组织培养的过程包括脱分化和再分化。
2,培养基是组织培养时植物组织或器官赖以生长和发育的营养条件。包括植物需要的大量元素、微量元素、有机成分、激素和琼脂。培养基中通常加一定量的蔗糖是除作为营养成分外,还用于维持一定的渗透压。细胞分裂素/生长素的摩尔浓度比决定组织是生根还是生芽,当两者比例高时(细胞分裂素>生长素),诱导芽的生成;两者大致相等时(细胞分裂素=生长素),愈伤组织继续生长而不分化;两者比例低时(细胞分裂素<生长素),诱导根的形成。但实验中不用天然激素而是用人工合成的激素(如奈乙酸NAA、6—苄基氨基腺嘌呤BA等)是因为植物中存在相应的分解天然激素的酶而没有人工合成激素的相应的酶,所以天然激素在植物体内作用和存在的时间短,人工合成激素的作用和存在的时间长,作用效果明显。最常用的MS培养基(生芽培养基、生根培养基)。配制过程包括称量、溶解、调PH、融化、分装(三角瓶)、加盖灭菌等步骤。
3,培养过程应该在无菌的条件下进行,实验经过外植体—愈伤组织—丛状苗—生根苗—移栽植株。需要一定的光照和温度的条件。

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